周三，伊朗最高领袖哈梅内伊通过国家新闻发表强硬讲话，驳斥美国总统特朗普前日“无条件投降”的要求，警告若美国军事警告，伊朗将令其遭受“无法弥补的损害”。特朗普在白宫回应：“祝你”。他前日在社交媒体暗示可能暗杀哈梅内伊，称“知道他在哪里”。
哈梅内伊在以色列空袭后第二次公开露面，斥责特朗普言论为“威胁和荒谬”，强调“了解伊朗的聪明人不会以威胁语言对待我们”。伊朗外交部发言人警告，美国进一步介入或引发“全面战争”。德黑兰重申将继续“为和平目的”进行铀浓缩，拒绝特朗普要求完全放弃核计划。
尽管美国最初表示希望避免冲突，特朗普近日加大施压，向中东增派军舰和军机，称目标不仅是停火，而是“远超停火”的结果。据现任及前任美国官员透露，特朗普正考虑包括直接军事打击在内的多种选项。周三被问及是否会打击伊朗时，他未明确回应：“没人知道我要做什么。伊朗麻烦大了，他们想谈判。”他提及已向伊朗发出“最后通牒”，但未透露细节。
特朗普还透露，周二与俄罗斯总统普京通话时，拒绝了其在以伊冲突中斡旋的提议，称普京应“先调解俄罗斯自己的战争”。同日，以伊冲突进入第六天，以色列对德黑兰工业区发布疏散警告后展开新一轮空袭，伊朗持续反击。最新数据显示，伊朗死亡人数超过585人，以色列死亡24人。以色列部分地区在空袭警报中谨慎恢复日常。
